Technique multi-échantillons pour analyser l’adhésion cellulaire

Technique multi-échantillons pour analyser l'adhésion cellulaire

Technique multi-échantillons pour analyser l'adhésion cellulaire

Le nouveau test développé au KAUST est un test de laminage cellulaire multiplex fluorescent qui utilise des marqueurs fluorescents uniques pour marquer jusqu’à sept types de population cellulaire. Crédit: © 2020 Elham Roshdy

Les chercheurs de l’Université des sciences et technologies de la King Abdullah ont développé une méthode robuste et efficace pour examiner les interactions entre les cellules à l’aide d’un marquage fluorescent, analyser simultanément plusieurs populations cellulaires et accélérer un processus autrefois fastidieux et limitant. Le nouveau test a également des applications dans l’étude des processus cellulaires dans l’inflammation ou la métastase des cellules cancéreuses et dans l’évaluation des traitements potentiels.


Les cellules se déplacent à travers les vaisseaux sanguins via l’adhésion cellulaire, l’interaction et la fixation des cellules les unes aux autres via des molécules spécialisées à la surface des cellules. Pendant le flux sanguin, les forces de cisaillement agissent sur les cellules pour orchestrer l’adhésion cellulaire. La manipulation de l’adhésion cellulaire peut entraîner une inflammation et des maladies comme le cancer, tandis que des agents pathogènes tels que les virus exploitent l’adhésion cellulaire pour infecter le corps.

« Le test conventionnel utilisé pour étudier les interactions cellule-cellule est le test de la chambre à écoulement à plaques parallèles (PPFC), qui enregistre des vidéos de cellules roulant dans le flux et adhérant aux molécules sur les cellules endothéliales (cellules de revêtement des vaisseaux sanguins) », explique le chef de groupe Jasmeen Merzaban . « Ce test est utilisé depuis des décennies, mais il est sujet à des erreurs et à des biais possibles, et il ne peut analyser qu’un seul type de cellule à la fois, ce qui le rend extrêmement chronophage. »

Ayman AbuElela, avec les autres étudiants diplômés du laboratoire de Merzaban, voulait améliorer PPFC et accélérer les analyses.

Leur nouveau test de roulement de cellules multiplexes fluorescentes (FMCR) utilise des étiquettes fluorescentes uniques pour étiqueter jusqu’à sept types de population cellulaire. Les échantillons cellulaires sont mélangés juste avant d’entrer dans le flux simulé sur une couche de cellules endothéliales. Un microscope confocal spectral capture des images des populations cellulaires mixtes en temps réel à haute résolution temporelle en un seul passage. Cela permet aux chercheurs de collecter des données sur la cinétique cellulaire, y compris la fréquence de roulement, la vitesse et la capacité d’attache des différents types de cellules.

Technique multi-échantillons pour analyser l'adhésion cellulaire

Contrairement au test de laminage cellulaire standard, qui nécessite une exécution de l’expérience pour chaque type de cellule, le nouveau test de laminage cellulaire multiplex fluorescent de l’équipe utilise des étiquettes fluorescentes uniques pour étiqueter jusqu’à sept types de population cellulaire. Crédit: © 2020 KAUST

«Nous avons développé un pipeline complet d’analyse de données, qui nous permet d’analyser les multiples types de cellules que nous obtenons par cette approche et atteint une puissance statistique et une sensibilité élevées», explique AbuElela. « Le FMCR est maintenant utilisé dans notre laboratoire pour étudier la migration de diverses cellules humaines, y compris les cellules souches, les cellules immunitaires activées et les cellules cancéreuses du sein. »

Un autre avantage de la nouvelle procédure est qu’avant ou pendant le test, un composé à tester tel qu’un nouveau médicament peut être ajouté aux cellules pour étudier l’effet du composé sur l’adhésion cellulaire.

« Ces études fournissent des informations importantes sur l’effet des traitements sur la migration et les métastases des cellules et sur la façon dont les médicaments pourraient agir à l’intérieur du corps », note Merzaban.


Les cellules se protègent contre le stress en restant ensemble


Plus d’information:
Ayman F. AbuElela et al, Fluorescent Multiplex Cell Rolling Assay: Simultaneous Capture up to Seven Samples in Real-Time Using Spectral Confocal Microscopy, Chimie analytique (2020). DOI: 10.1021 / acs.analchem.9b04549

Fourni par l’Université des sciences et technologies du Roi Abdallah

Citation: Technique multi-échantillons pour analyser l’adhésion cellulaire (2020, 7 juillet) récupérée le 7 juillet 2020 sur https://phys.org/news/2020-07-multisample-technique-cell-adhesion.html

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